Die Tour beginnt am Parkplatz Tor di Quinto, der von Via Olimpica aus leicht zu erreichen ist. Fahren Sie den städtischen Abschnitt des Tiber-Radwegs entlang des Ufers und dann zurück nach Trastevere. Dies ist der interessanteste Abschnitt des Tiber-Radweges.
Von hier aus geht es weiter, immer noch auf dem asphaltierten Radweg, zum Circus Maximus und dann zu den Caracalla-Thermen. Nachdem man die Kreuzung mit der stark befahrenen Via Cristoforo Colombo dank der Ampelanlage passiert hat, gelangt man auf Via Appia Antica.
Der erste Einbahnstraßenabschnitt führt über Kopfsteinpflaster. Passieren Sie die Porta di San Sebastiano und gehen geradeaus weiter bis zur Abzweigung, an der Sie den Park der Katakomben von San Callisto betreten. Verlassen Sie den Park, in dem der Autoverkehr eingeschränkt ist, und kehren auf Via Appia Antica zurück, um zum Mausoleum von Cecilia Metella zu gelangen. Unmittelbar danach beginnt ein Stück ursprünglicher asphaltierter Straße, die für Autos gesperrt ist, aber auch mit dem Fahrrad nur schwer zu befahren ist (man kann den Singletrack auf der linken Seite benutzen).
An diesem Punkt beginnt der für Autos gesperrte Park von Via Appia Antica. Die Oberfläche ist asphaltiert, aber an den Seiten, sowohl links als auch rechts, gibt es zwei Singletracks, die nicht für Rennräder geeignet sind und die man benutzen kann, um sie zu umgehen.
An die Fahrtrichtung sind keine besonderen Anforderungen zu stellen. Man muss nur bedenken, dass neben den Fahrrädern auch viele Fußgänger auf der Straße unterwegs sind.
Die Strecke entlang der Straße ist sehr schön und interessant und kann vor der Einmündung in die stark befahrene Via Appia Nuova nach etwa 7 km beliebig unterbrochen werden (zu vermeiden).
Man kehrt um, indem man eine der beiden unbefestigten Strecke wählt und den Weg bis zur Porta di San Sebastiano zurückverfolgt. Hier muss man wegen der Einbahnstraße links abbiegen und den Mauern von Viale di Porta Ardeatina folgen und in die Fortsetzung von Via Cristoforo Colombo einbiegen, um zur Ampel zurückzukehren, die Straße zu überqueren und den Radweg der Caracalla-Thermen wieder aufzunehmen.
Wieder am Circus Maximus angekommen, biegen Sie rechts in Via di San Gregorio ein, um zum Kolosseum zu gelangen. Von hier aus geht es weiter über Via dei Fori Imperiali zu Piazza Venezia.
Vom Platz aus muss man sehr vorsichtig vorgehen, da man gezwungen ist, sich in den Verkehrsfluss der Stadt einzufügen, der zu bestimmten Zeiten chaotisch sein kann. Biegen Sie rechts ab, um von Via IV Novembre zum Quirinale aufzusteigen.
Nachdem Sie Piazza del Quirinale passiert haben, fahren Sie weiter auf Via XX Settembre und biegen an Largo Santa Susanna links in Via Bissolati in Richtung Via Veneto ein. An Porta Pinciana biegen Sie nach rechts und dann nach links ab und dann nach rechts in Via San Paolo del Brasile, um zu Piazzale delle Canestre zu gelangen. Hier biegen Sie nach rechts ab und folgen der Straße innerhalb Villa Borghese bis zu Piazzale delle Belle Arti und fahren auf dem Radweg (auf dem Bürgersteig) weiter, um Ponte Risorgimento zu überqueren und wieder auf den Tiberradweg zu gelangen, den Sie auf der Hinfahrt zu Tor di Quinto befahren haben.